乳酸酶联*试剂盒现货 人维生素酶联*试剂盒 鸡甲状腺素(T4)酶联*试剂盒使用目的: 本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中甲状腺素(T4)含量。 实验原理 鸡甲状腺素(T4)酶联*试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡甲状腺素(T4)水平。用纯化的鸡甲状腺素(T4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲状腺素(T4),再与HRP标记的甲状腺素(T4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成较终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状腺素(T4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡甲状腺素(T4)浓度。 鸡甲状腺素(T4)酶联*试剂盒组成 130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(160μg/L)0.5ml×1瓶 3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 鸡甲状腺素(T4)酶联*试剂盒操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 80μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 40μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 20μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 10μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl, 然后再加待测样品10μl(样品较终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 鸡甲状腺素(T4)酶联*试剂盒注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间较好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,较好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 鸡甲状腺素(T4)酶联*试剂盒保存条件及有效期 1.试剂盒保存:2-8℃。 2.有效期:6个月 上海双赢生物科技有限公司ELISA检测试剂盒技术原理 ???(1).?抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 ???(2).?结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其*学活性。 ???(3).?酶标记的抗原或抗体既保留其*学活性,又保留酶的活性。 ???(4).?受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。 ???(5).?此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。 ???(6).?加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以*学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术 双赢ELISA试剂盒产品齐全,优势显着: (1)、原装进口抗体——高效性、灵敏性、特异性 (2)、规范包被操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高 (3)、先进的优化方案——回收利用率高、可靠性强 (4)、适用范围——适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。 (5)、可检测指标齐全——生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等 上海双赢生物科技///乳酸酶联*试剂盒现货 人维生素酶联*试剂盒